Biología molecular y citogenética.

1. Objetivo. Introducirnos en los principios y práctica de la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) mediante el estudio de la determinación del Rh utilizando para ello la técnica de la PCR. 2. Fundamento. La PCR (Reacción en cadena de la Polimerasa) es una técnica avanzada que fue inventada por el bioquímico estadounidense Kary Mullis en 1985. Esta técnica permite amplificar pequeñas regios específicas del ADN en laboratorio. Es decir, consigue que un pequeño segmento de ADN que pasaría desapercibido en un análisis cualquiera se multiplique millones de veces y así sea fácil de detectar. La técnica se fundamenta en la propiedad natural de los ADN polimerasas para replicar hebras de ADN, para lo cual se emplean ciclos de altas y bajas temperaturas alternadas para separar las hebras de ADN recién formadas entre sí tras cada fase de replicación y, a continuación, dejar que las hebras de ADN vuelvan a unirse para poder duplicarlas nuevamente. La espectrofotometría

1. Objetivo. Extraer el ADN de los linfocitos de sangre venosa. 2. Fundamento. El ADN se encuentra en el interior del núcleo celular, disperso, muy replegado y unido a proteínas formando la cromatina. Para poder extraerlo es necesario romper las células y separar el núcleo del resto de los componentes celulares para después volver a romper su membrana y liberar el ADN. Una vez liberado el ADN es necesario separarlo de las proteínas y provocar la precipitación de éstas, así como finalmente eluír el ADN. Para llevar a cabo dichos procesos deberemos pasar por tres fases: preparación, extracción y purificación. En ésta práctica extraeremos el material genético de los leucocitos, los cuales son células inmunitarias presentes en la sangre, principalmente. 3. Materiales. 4. Procedimiento. Durante todo el protocolo seguiremos la técnica aséptica, la cual es descrita en la práctica 3 (  https://elenaylosdesoxirribonucleotidos.blogspot.com/2018/11/practica-3-tecnica-asepti