Ir al contenido principal

Entradas

Mostrando entradas de noviembre, 2018

Práctica 4: Cultivo celular.

1. Objetivo. Realización de un cultivo celular de células eucariotas de insecto en un medio de penicilina preparado en la práctica anterior (3), prestando atención en efectuar las operaciones según la técnica aséptica aprendiendo en el tema 2 y aplicando el marco teórico del tema 10 (de cultivos celulares) a la práctica. 2. Fundamento. El Real Decreto 664/1997, de 12 de mayo , define los cultivos celulares como el resultado del crecimiento in vitro de células obtenidas de organismos multicelulares. Por otro lado, podríamos determinarlo como  el conjunto de procedimientos que hacen posible el mantenimiento de células de organismos pluricelulares in vitro , preservando al máximo sus características fisiológicas, bioquímicas y genéticas. Los cultivos celulares son realizados a partir de suspensiones celulares introducidas en recipientes adecuados (T-flasks) junto con un medio de cultivo para posteriormente incurbarse en las condiciones óptimas para que las células proliferen.

Práctica 3: Técnica aséptica básica.

1. Objetivo. Realización correcta de la técnica aséptica en el procedimiento de trasvase de penicilina para un futuro cultivo celular, siendo indispensable su aprendizaje y posterior interiorización de la misma en la Biología Molecular debido a la facilidad de contaminación de las muestras de ácidos nucleicos. 2. Fundamento. La técnica aséptica reúne un conjunto de procedimientos y actividades que se realizan con el fin de disminuir al mínimo las posibilidades de contaminación por sustancias no amplificadas presentes en la superficie de trabajo, del propio trabajador y microorganismos ambientales, así como la contaminación por carryover (contaminación de sustancias amplificadas). Éstos procedimientos están encaminados a la reducción o eliminación de arneasas, desoxirribonucleasas y microorganismos. 3. Materiales. Cabina de bioseguridad tipo II. Penicilina en un frasco. Tubo cónico tipo Falcon. Pipeta. Auxiliar de pipeteo (automático o manual) o pera de caucho

Práctica 2. Manejo de la cabina de flujo laminar.

1. Objetivo. Al igual que en la primera práctica, deberemos seguir tomando confianza y/o manejo con los instrumentos del laboratorio de Biología Molecular. La cabina de flujo laminar es la cabina que usaremos con mayor frecuencia durante todo el curso, siendo indispensable aprender a manejarla correctamente y con fluidez. 2. Fundamento.  Una  cabina de flujo laminar ,  cámara de flujo laminar  o  campana de flujo laminar  es un recinto que emplea un ventilador para forzar el paso de aire a través de un filtro HEPA o ULPA  y proporcionar aire limpio a la zona de trabajo libre de partículas de hasta 0.1 micras. El material utilizado en la Biología Molecular es altamente susceptible a la contaminación debido a, principalmente, arnasas en el ambiente; en consecuencia, es imprescindible prevenirlas a toda costa mediante éste tipo de equipo (entre otros). 3. Materiales. Puntas de micropipetas. Tubos Eppendorfs. Papel de filtro. Gradilla. Asas de siembra. Cabina de flu