Biología molecular y citogenética.

1. Objetivo. Averiguar el número de células vivas de nuestro cultivo celular. 2. Fu ndamento . Para iniciar un cultivo, así como realizar un seguimiento del mismo, se debe conocer la densidad celular en número de células/ml. Las células contadas deben estar vivas, por lo que también debemos de comprobar su viabilidad. Ambos procesos se realizan simultáneamente mediante los métodos de coloración vital con azul tripán (colorante que penetra en las células cuya membrana está rota) y recuento o contaje celular con un hemocitómetro denominado cámara de Neubauer. La cámara de Neubauer es  un  portaobjetos  que tiene dos zonas ligeramente deprimidas en cuyo fondo se ha marcado con la ayuda de un  diamante  una cuadrícula de dimensiones conocidas. Se cubre la cámara con un  cubreobjetos  que se adhiere por simple tensión superficial (en especial una vez que se haya añadido la muestra líquida). 3. Material y reactivos. Gradilla. Tres tubos Eppendorf. Colorante azul tripán. Mi

1. Objetivo. Renovación del medio de cultivo. 2. Fundamento. Un medio de cultivo es una sustancia compuesta por compuestos nutritivos que imitan el entorno natural de las células. Contiene fuentes de nitrógeno, carbono y vitaminas, suero descomplementado, indicadores del pH, sales minerales, tampones y antibióticos y/o antifúngicos, entre otros. Las células de insectos cultivadas requieren una fuente consistente de nutrientes para crecer y dividirse, los cuales se proporcionan en el medio de células de insectos. Con el tiempo, las células agotan los nutrientes y factores de crecimiento del medio, acumulando  productos de desecho tóxicos de las células en el medio de cultivo. Las células dejadas en estas condiciones finalmente morirían, por lo que es importante cambiar regularmente los medios para mantener un cultivo sano.  3. Material y reactivos. Baño termostático. Alícuota con penicilina (medio de cultivo). Gradilla. Pipeta de 2 ml. Auxiliar de pipeteo. Cultivo c

1. Objetivo. Examinar las células del cultivo celular (creado el día 23 de noviembre de 2018) para comprobar su estado de salud. 2. Fundamento. Es importante examinar las células de nuestro cultivo periódicamente para comprobar que están sanas y se han realizado todos los procedimientos eficazmente. Las contaminaciones en los cultivos celulares se refieren principalmente a la alteración del cultivo por la presencia de microorganismos no deseados y que son omnipresentes en el ambiente (bacterias, levaduras y hongos, micoplasmas y virus).  Los principales microorganismos que podremos observar en el microscopio invertido serán bacterias, hongos y levaduras, respectivamente: Bacterias : los medios parecen nublados y pueden tener una película blanca en la superficie. Bajo el microscopio se verán células pequeñas y granulares, como puntos negros. Hongos : micelios filamentosos delgados que cubren el cultivo, como crecimiento borroso (típicamente blanco o negro) que es